Gentechnische Methoden

Wie funktionieren bestimmte gentechnische Methoden, die dringend bentigte Ergebnisse liefern sollen? Welches Verfahren ist fr ein Experiment am besten geeignet? Welche Kontrollen sind sinnvoll? Wie genau muss ein Puffer angesetzt werden und wie war das noch mal mit der Reihenfolge im Pipettierschema? In der 5. Auflage dieses bewhrten Laborhandbuches werden molekularbiologische Methoden in Form von eindeutigen und reproduzierbaren Arbeitsvorschriften prsentiert, um die tglichen Hrden des Laboralltags zu meistern. Es richtet sich an Bachelor-, Master- oder Diplomstudierende sowie an Technische Assistenten, die neue Methoden etablieren wollen, und erfahrene Wissenschaftler zum schnellen Nachschlagen. Die Autoren sind in Lehre und Forschung oder in der Industrie ttig und geben hier ihr Wissen und ihre jahrelange Laborerfahrung weiter. Die meisten Methoden und Rezepte sind erfolgreich etabliert, andere wurden erst aktuell eingefhrt. Zu Beginn eines jeden Abschnitts wird der Leser ber die wichtigsten Konzepte informiert. Es folgt ein praktischer Teil mit Arbeitsanleitungen, die Schritt fr Schritt das Erlernen und genaue Anwenden der Methoden ermglichen. Besonderer Wert wurde auf Sicherheitshinweise und das Aufzeigen mglicher Fehlerquellen gelegt. Inhaltsbersicht: 1 Allgemeine Methoden 2 Gelelektrophoresen 3 Isolierung von DNA 4 Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 5 Klonierung von cDNA (cDNA-Genbank) 6 Klonierung von genomischer DNA (genomische Genbank) 7 Isolierung und Markierung von RNA 8 RNA-Interference 9 Gewebeprparation 10 Detektion von Protein und Nucleinsure auf Membran 11 In situ-Hybridisierung 12 Transfektion von Sugerzellen 13 Transformationsmethoden fr filamentse Pilze 14 Genexpression in E coli und Insektenzellen: Reinigung rekombinanter Proteine 15 Das Pichia pastoris-Expressionssystem 16 Verminderung der Genexpression ber Ribozym-Targeting 17 Analyse der Genregulation 18 Peptidarrays auf Cellulosemembranen 19 Genexpressionsanalyse mit Microarrays 20 Text- und sequenzbasierte Datenbank-Abfragen in der Bioinformatik Anhang 1 Sequenzierung von DNA Anhang 2 Proteinidentifizierung und Sequenzierung In der 5. Auflage wurden neben der berarbeitung der grundlegenden Kapitel zu den molekularbiologischen Methoden die Kapitel zu RNAi, Bioinformatik und zu Microarrays deutlich ausgebaut. Ein Kapitel zur Fixierung und Aufbereitung von Gewebe ist neu hinzugekommen. Damit ist dieses Buch wiederum ein unverzichtbares Hilfsmittel fr jedes molekularbiologische Labor.